兔场实验室细菌培养技术

细菌分离培养是兔场实验室诊断工作中一个十分重要的步骤，通过对细菌的分离和纯培养，可以根据菌落的形态、大小、结构、色泽、气味以及有无溶血等情况进行初步鉴定，然后通过进一步的染色镜检或者是特殊培养进行鉴定或研究，为病原的确诊提供依据。 1．培养基制备培养基是细菌学检查过程中非常重要的材料，它含有细菌生长所必需的营养物质，细菌经过培养基的纯培养，才能够进行准确的检查，得到可靠的结果。 (1)肉水的制作： ①材料：瘦牛肉500克，蒸馏水(或常水)1000毫升。 ②方法：取瘦牛肉除去脂肪、肌腱，切成碎块或绞碎，按1千克牛肉2千毫升水的比例，加水浸泡一夜，煮沸一小时，用纱布初步滤去肉渣挤出肉水，再用滤纸滤过，补足原有水量，装入烧瓶中置高压灭菌器中120℃20分钟灭菌，制成肉水。制作肉水的另一种方法是：取牛肉浸膏0.5-1.0克，加蒸馏水100毫升，加热溶解，滤纸滤过，并同上述方法进行灭菌即成。 ③用途：制作各种培养基的基础。 (2)营养肉汤： ①材料：肉水1000毫升，蛋白胨I0克，氯化钠5克。 ②方法：将蛋白胨和氯化钠加入肉水中，稍加热溶解，用氢氧化钠溶液调整pH值为7.4-7.6之间，再加温使溶液均匀。滤过分装后高压灭菌备用。 ③用途：可供一般的细菌生长需要，检查细菌的生长表现，也可作为制作固体培养基的基础。 (3)营养琼脂： ①材料：营养琼脂粉40克，蒸馏水1000毫升。 ②方法：将营养琼脂粉加入蒸馏水中，搅拌浸泡1小时，加热使充分溶解，高压灭菌备用。 ③用途：分离细菌纯培养及作为其他特种培养基的基础。 (4)血液琼脂培养基： ①材料：脱纤维血5-10毫升，营养琼脂100毫升。 ②方法：准备好灭菌并有玻璃珠的三角烧瓶，无菌采集血液，注入三角烧瓶中，不停地摇动，直至血纤维分离为止，一般需要10分钟。